金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101:什么是质粒?

发布者马戈R.梦露在2020年4月2日下午2时17分39秒


最初发表2014年1月14日和更新的2020年4月2日。

谁加入的分子生物学实验室的任何新人无疑将被要求进行设计,修改,或构建一个质粒。质粒是DNA的小圆片在细菌细胞中发现,有人新质粒,可能需要一些额外的指导,以了解具体的组件,使质粒,为什么每个是非常重要的。

我们的“金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101”系列旨在教育的科学家和爱好者质粒各级 - 作为介绍质粒。金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101将为您提供的一般分子生物学的知识和技术的概述,以及与基本面的深刻理解使您。我们的使命是为策划质粒一站式的参考指南,让你可以花费更少的时间来研究的基本知识,并花更多的时间来开发必要推进该领域设计巧妙的实验和创新的解决方案。


什么是质粒?

在其最基本的层面上,质粒是从主机的染色体DNA独立复制DNA的小圆片。他们主要存在于细菌,而且在古自然存在,如酵母和植物真核生物这样。在自然界中,质粒提供一个或主​​机多个功能的好处,如对抗生素的抗性,降解功能,和/或毒力。所有天然质粒包含复制起点(其控制宿主范围和拷贝数质粒的),并且通常包括一个基因,该基因对存活,有利如抗生素抗性基因。与此相反,在实验室中使用的质粒是通常人工并设计成外源DNA引入另一小区。最低限度,实验室创建质粒具有复制,选择标记和克隆网站的原点。修改质粒的易用性和质粒的自我复制的细胞内的能力,使他们对生命科学家和生物工程师吸引力的工具。质粒图表示质粒的部分

矢量元素 描述
复制起点(ORI) DNA序列,它通过招募复制机制的蛋白质允许质粒内复制起始
抗生素抗性基因 允许含质粒的细菌的选择。
多克隆位点(MCS) 短段其中包含几个限制性酶切位点,允许DNA的容易插入的DNA。在表达质粒中,MCS常常是从一个启动子的下游。
基因,启动子或克隆到MCS用于进一步研究其他DNA片段。
启动子区 驱动转录靶基因。为表达载体重要组成部分:确定哪些类型的细胞中的基因表达和获得的重组蛋白质的量。
选择标记 抗生素抗性基因允许在细菌中选择。然而,许多质粒也有在其他细胞类型的选择标记。
引物结合位 短的单链DNA序列用作起始点用于PCR扩增或测序。引物可被利用为质粒的序列验证。

上面的质粒图谱和表格轮廓质粒的共同engineerable特征。有关历史,重要性和类型的质粒的更多细节,请查看Addgene公司的分子生物学质粒参考

如何质粒在实验室构建的?

由于它们的人工自然,实验室质粒通常被称为“载体”或“构建体”。要插入的感兴趣的基因插入载体,科学家可利用的各种一克隆方法(限制性内切酶,依赖于连接的,网关,吉布森等)。该克隆方法最终选择基于质粒要克隆成。无论如何,一旦克隆步骤后,包含新插入的基因的载体转化到细菌细胞,并在抗生素板选择性地生长。

Addgene公司编制了各种教育资源,促进在实验室质粒使用。Addgene公司的分子生物学参考包括有关的分子克隆,如何选择一个质粒载体,分子生物学工具和参考资料,以及如何保持你的质粒的股票信息。该指南还包含多种协议和故障排除技巧,使质粒用法简单明了越好。

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科学家怎样使用质粒?

通常,科学家使用质粒来操纵在靶细胞中的基因表达。特点如灵活性,通用性,安全性和成本效益使分子生物学家广泛地利用在宽范围的应用的质粒。一些常见的质粒类型包括克隆质粒,表达质粒,基因敲除质粒,记者质粒,病毒质粒基因组工程质粒。

到目前为止,世界各地的科学家都广泛使用该载体进行实验包含荧光成像,重组DNA技术,大规模生产蛋白质,疾病建模,药物发现和基因组编辑(只是仅举几例)。

如果您有关于特定质粒元素的问题,你想回答或任何话题我们建议金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101系列,请让我们知道了意见。


注意:马西帕特里克促成了这篇文章的写作。

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