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小鼠模型,第2部分:繁殖和杂交小鼠

发布的读经文温斯坦2019年8月6日上午8:55:01

鼠标建模博客系列的第1部分,我们涵盖了可用于将基因修饰引入小鼠胚胎的技术。但是一旦你培育出不断增长的基因工程老鼠群体,你能做什么呢?在这篇文章中,我们将介绍为什么以及如何杂交小鼠来创建双敲除系和crel -lox系,以及如何在你的实验中适当地控制基因工程小鼠。

正如你在第一部分中了解到的,有许多类型的基因工程小鼠:转基因小鼠,敲除和敲除小鼠,条件敲除或敲除小鼠。虽然这些技术都可以在小鼠基因组中引入一种修饰,但它们通常不用于引入多个突变。这是因为随着更多的突变被引入到单个胚胎中,小鼠在每一个等位基因上最终得到预期基因型的可能性就降低了。

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主题:Cre-lox,其他,生物

一名神经学家认为,crel -lox和Flp-FRT的高级用法

发布的客人的博客2017年10月19日上午9:54:49

这篇文章由客座博客Katrin Michel贡献。

Cre-lox是一个令人难以置信的流行和强大的位点特异性重组酶(SSR)系统,但它只给你一个单一水平的控制不修改-无论是Cre存在或不存在。通过协同使用其他SSR系统FLP-FRT, crei介导的对DNA重组和基因表达进行位点特异性(通常是细胞类型特异性)控制的可能性可以提高。此外,各种时空控制FLP和Cre表达的方法也得到了发展。继续阅读,了解更多关于FLP- frt、crel -lox,以及FLP和Cre的组合如何实现额外的基因控制。

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主题:Cre-lox,质粒,神经科学188棋牌游戏

金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101:敲除/敲入质粒

发布的Benoit Giquel2016年12月1日上午10:30

研究一个基因功能最有效的策略之一是用实验室设计的DNA片段替代或破坏该基因,从而使其失活或“敲除”。特制的质粒可用于替代酵母、小鼠或其他动物的基因果蝇通过同源重组。其概念很简单:将目标序列修改后的模板传递给细胞,细胞会将模板与内源性基因重新结合。在这里,我们将描述用于灭活哺乳动物细胞中特定基因的技术和质粒。尽管CRISPR-based淘汰赛/敲入这些系统仍然是有价值的,特别是在CRISPR不能使用的情况下(例如,附近没有合适的PAM序列,或者你感兴趣的基因很难用gRNA特异性靶向)。在选择击倒策略时,一定要记住这些技巧!

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主题:金宝搏手机旗舰厅app登录,Cre-lox,质粒

金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101:柔性载体

发布的米歇尔·克罗宁2016年4月28日上午10:30

在质粒101系列之前的一篇文章中,我们了解了如何进行金宝搏手机旗舰厅app登录Cre-loxP复合系统可用于诱导位点特异性重组事件,而侧位loxP位点的定位将引导Cre重组酶反转、移位或切除DNA片段。野生型和突变型loxP网站的可用性使科学家们能够以新的创造性的方式利用这个系统。今天的帖子将集中讨论这样一种策略——theFLEx开关——利用重组元件关闭一个基因的表达,同时开启另一个基因的表达!

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主题:金宝搏手机旗舰厅app登录,Cre-lox,质粒

教老狗新把戏:用绿色荧光蛋白控制蛋白质活动

发布的玛丽传动装置2015年11月24日上午10:30

在Addgene,我们相爱绿色荧光蛋白而当存款人找到新方法,让这种重要的蛋白质变得更有用时,我们总是很兴奋!从FPs最适合氧化环境photoconvertible变体, GFP似乎总是在学习新的东西。现在,工作康妮Cepko的实验室允许研究人员仅在GFP存在的情况下激活转录或Cre重组酶活性。这些系统,称为T-DDOGCre-DOG,将流行的GFP报告程序用于更复杂的实验操作,节省了开发新程序所需的时间和金钱。

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主题:188滚球与投注,Cre-lox,其他荧光蛋白188金宝搏官网app工具

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