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发布者游客的博客在2020年9月24日上午9点15分00秒

2017年5月3日公布的最初和最后更新2020年9月24日

这个职位是在Broad研究所,约翰Doench贡献的客人博客,Addgene公司顾问委员会的成员,和研究所的科学家。

CRISPR技术已经取得了比以往任何时候都更容易工程师特定DNA编辑和执行功能筛选,以确定参与的目的表型基因。本博客文章将讨论这些方法之间的差异,并提供如何更好地设计gRNAs更新。你也可以找到在Addgene公司的你的下一个实验验证gRNAs验证gRNA序列数据表。这些问题的更广泛的讨论可以在两个最近的评论文章中找到(Doench等人,2017年汉纳等人。2020年)和其中的参考文献。

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话题:CRISPRCRISPR gRNAs

CRISPR 101:gRNAs的多重表达

发布者玛丽杠杆上2020年9月10日上午07点45分00秒

最初发表2016年1月28日和最后更新2020年9月10日由珍妮弗曾。

CRISPR可以很容易地针对多个位点 - 称为概念。由于CRISPR就是这样一个强大的系统,编辑或标记效率,当你一个质粒上添加多个gRNAs通常不会改变。听起来不错?Addgene公司有许多工具可以帮助您复用 - 我们将使用哺乳动物质粒为您介绍一些您可能选择和克隆方法,但请向下滚动以便适用于其他模型系统,包括质粒大肠杆菌,植物,果蝇,和斑马鱼!

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话题:CRISPRCRISPR 101CRISPR gRNAs

总理编辑:添加精确性和灵活性,以CRISPR编辑

发布者曾珍在2019年10月24日上午09点26分53秒

更新2020年6月5。

有迹象表明,已在人类确定和编目的超过75,000致病基因变异ClinVar数据库。以前开发的基因组采用核酸酶的编辑方法和编辑基地只有纠正这些变种在大多数细胞类型的少数潜力。从一个新的技术,刘大卫的实验室Broad研究院能更精确和灵活添加到CRISPR编辑世界。

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话题:CRISPR中科院蛋白质CRISPR gRNAs基本编辑

自CRISPR屏幕及绿色软件上市

发布者游客的博客在2017年7月11日上午十点三十分00秒

这个职位是贡献的来宾博客弗雷德里克Wermeling,领袖在中枢分子医学(CMM),医药,索尔纳,卡罗林斯卡医学院的部门,在瑞典一个研究小组。

它可以是非常耗时的设计5点引导的RNA(gRNAs)针对各1000个基因的你想在你的下一个调查CRISPR屏幕。幸运的是,绿色上市软件可以帮助您在不到一分钟做只是这,大概(1)。

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话题:CRISPRCRISPR gRNAs

截断gRNAs调节基因表达

发布者游客的博客于2017年1月10日上午10时37分46秒

这个职位是贡献的来宾博客阿利萨兰斯-Byrne和亚历克斯·查韦斯,研究人员在威斯研究所生物启发工程。

CRISPR / Cas9技术已经彻底改变了分子生物学和生物工程领域,因为它促成了一个简单而做出有针对性的遗传修改的可扩展性手段的发展。Cas9是当与适当设计的小RNA复合,或引导RNA(gRNA),其可以被定向到几乎任何基因座的DNA结合蛋白。所述gRNA通常包含将靶位点,或protospacer互补,在基因组中的20个核苷酸的序列。天然Cas9具有两个催化结构域,其每一个在结合的protospacer裂解DNA的一条链。将得到的双链断裂,可以利用任灭活的基因或引入所需遗传改变(DSB)刺激DNA修复机制。

听我们的播客Intervew与亚历克斯·查韦斯

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话题:CRISPRCRISPR gRNAs

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