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金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101:复制起点

发布者肯德尔摩根2020年11月11日上午9:23:38

最初发表2014年2月6日和最后更新二○二○年十一月一十日。

现在我们都知道了抗生素抗性基因,让我们考虑另一个任何质粒的基本元件:复制/复制的起源。该复制由复制的原点(ORI)和它的所有控制元件。该ORI是其中DNA复制的开始,使质粒复制本身,因为它必须对细胞内生存的地方。

质粒的复制子通常不同于那些用来复制宿主染色体DNA的复制子,但它们仍然依赖宿主机制来进行额外的复制。ORI序列是在A和T通常较高。你为什么问?那么,A-T碱基对与两个氢键不是三个如G-C对保持在一起。其结果是,在A-T对富含DNA的段可以更容易地在较低温度下分离,并允许复制机械室进来和忙碌复印。

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金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101:用于质粒克隆筛选策略

发布者詹妮弗曾在2020年9月15日上午09点15分00秒

如果你正在克隆一个质粒,你将需要一种大海捞针的方法:一个完美的克隆,包含你正在寻找的质粒,从许多细胞中没有。开始寻找的一种方法是使用选择策略,其中只有获得或失去特定基因的细胞存活(例如:抗生素抗性标记)。在以前的博客文章中,我们介绍了如何使用正和质粒克隆的阴性选择

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金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101:什么是质粒?

发布者马戈R.梦露在2020年4月2日下午2时17分39秒

最初发表2014年1月14日和更新的2020年4月2日。

谁加入的分子生物学实验室的任何新人无疑将被要求进行设计,修改,或构建一个质粒。质粒是DNA的小圆片在细菌细胞中发现,有人新质粒,可能需要一些额外的指导,以了解具体的组件,使质粒,为什么每个是非常重要的。

我们的“金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101”系列旨在教育的科学家和爱好者质粒各级 - 作为介绍质粒。金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101将为您提供的一般分子生物学的知识和技术的概述,以及与基本面的深刻理解使您。我们的使命是为策划质粒一站式的参考指南,让你可以花费更少的时间来研究的基本知识,并花更多的时间来开发必要推进该领域设计巧妙的实验和创新的解决方案。


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金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101:质粒不兼容

发布者利亚Schwiesow在2020年3月31日上午09点15分00秒

质粒不相容被定义为不同的质粒没有能力在一个细菌细胞被维持。在这金宝搏手机旗舰厅app登录之后,我们将讨论为什么会发生这种情况,它如何影响你的工作,以及如何理解它可以用于好的方面。

首先,为什么质粒不兼容?质粒不相容时发生一个小区内的多个质粒具有相同的复制子和/或分隔系统。让我们先从replicon-包含复制起点和复制控制设备(需要在复制的原产地复习质粒的一部分,请参阅我们金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101:复制起点博客)。

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金宝搏手机旗舰厅app登录质粒101:正和质粒克隆的阴性选择

发布者詹妮弗曾2019年8月22日上午8:43:39

你一直努力净化你感兴趣的基因让它进入你的质粒主干,扎普DNA引入细胞中的混合物。不幸的是,并不是每一个细胞成功地占据了质粒DNA。其中那些确实,有些现在已经包含目的基因的质粒,但其他人认为摄取再连接上自己背质粒骨干。

因此,您的克隆策略需要识别含有你正在寻找的质粒结构的细胞。幸运的是,有很多方法可以做到这一点,包括积极选择、消极选择和/或筛选。在这篇博文中,我们主要关注积极和消极的选择,但别担心,我们将在以后的文章中讨论屏幕。

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